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Larry Daley (Ben Stiller) è separato e, disoccupato, rischia di perdere la custodia congiunta del figlio Nick. Accetta quindi di diventare il guardiano notturno al New York Museum of Natural History. Quello che non sa – e che ben presto scoprirà - è che nel museo durante la notte tutto, ma proprio tutto…prende vita! Larry deve vedersela quindi con gladiatori romani, cowboys, Attila, Cristoforo Colombo (Pierfrancesco Favino) e scimmie dispettose, uomini di Neanderthal e dinosauri, diventando il protagonista di divertentissime avventure. In mezzo a questo caos, Larry deve trovare una soluzione per salvare il museo e il proprio lavoro e ci riuscirà con l’aiuto del Presidente Teddy Roosevelt (Robin Williams).

Commento audio del regista
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